試劑配制： 1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。 2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。 3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。 4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。 6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100） 7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100） 8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 實驗標準品圖： 40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 測定步驟： 1.加樣 1. 除包被外都需45度加樣 2.加樣體積要準確 3.管底加樣，不能加在管壁上 4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡 2.溫浴 1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。 2.各ELISA板不應疊在一起。 3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。 4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。 3.洗滌 1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。 2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。 4.讀板 1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。 2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。 注意事項 1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。 2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。 3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間*控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 4．請每次測定的同時做標準曲線，*做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請*乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物請避光保存。 7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。 8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 9．本試劑不同批號組分不得混用。 10．如與英文說明書有異，以英文說明書為準。 ADAM11 去整合素樣金屬蛋白酶11抗體 ADAM12 去整合素樣金屬蛋白酶12抗體 ADAM15 去整合素樣金屬蛋白酶15抗體 ADAM2 去整合素樣金屬蛋白酶2抗體 ApoER2 載脂蛋白E2受體抗體 ADORA1 腺苷A1受體抗體 AQP0 水通道蛋白0抗體 AP2 gamma 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 ANGPTL5 血管**素相關(guān)蛋白5 ANKRD53 錨蛋白重復域53抗體 ANKRD54 錨蛋白重復域54抗體 ATP5B ATP合成酶β5抗體 ALS2CR3 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白3抗體 ADORA2B 腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 ALS2CR1 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體 APBA2 β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體（X11β） Diazepam Binding Inhibitor 乙酰輔酶A結(jié)合蛋白抗體 phospho-CDC16(Ser560) 磷酸化細胞分裂周期蛋白16抗體 AHI1 白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體 AICDA 活化誘導胞嘧啶核苷脫氨酶抗體 ABCA9 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白9抗體 ARF3 ADP核糖基化因子3抗體 AARSD1 含丙氨酰tRNA合成酶結(jié)構(gòu)域1抗體 AMIGO1 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 KAL1 卡爾曼綜合癥基因1抗體 ASB7 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體 ASB17 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體 ASB12 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體 ATPase Na+/ K+ beta 2 鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體 AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗體 ANKS1B β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體 ANKS6 錨蛋白重復及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 ART3 二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體 ART5 二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體 AMPD1 腺苷單磷酸脫氨酶1抗體 Ankyrin erythroid 紅細胞蛋白Ank1抗體