菌種的培養：產品僅用于科研

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純**菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種，用無菌手續挑取少許，接入瓊脂斜面培養基上，在25℃（或較高溫度）下培養5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養基）。

5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養基上，于25～28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續使用半年左右。

6、如果有些**菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養基，培養基中含有一些適合產孢子的營養成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃，少數為37 ℃，培養時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25～28 ℃，培養時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃，子瓶培養基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經培養后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉入發酵罐內發酵，稱為二級發酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內，經過培養形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發酵罐內發酵，稱為三級發酵。同樣道理，使用三級種子的發酵，稱為四級發酵。

微生物培養方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面，通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數，而稀釋涂布平板法培養過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿，輕輕搖動培養皿，使培養基溶液均勻分布在培養皿底部，待培養基溶液凝固后即得平板培養基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、46 [1, IFO 13718培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。

PIP StripspkDiphenhydramine 1474鹽酸苯海拉明

Class III PI3K Elisa Kit1ea 738鹽酸利多卡因

HyStem®-HP Hydrogel Kit7.5mlLevamisole 1659鹽酸咪唑

X-gluc1gVenlaine934139文拉法辛

酸性磷酸酶Acid Phosphatase Microplate Assay Kit0 AssaysVenlaine 98鹽酸文拉法辛

Epigoitrin  1072-93-1  中文名：表告依春  分子式：C5H7NOS    Humanai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 人抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Senkyunolide I  94596-28-8  中文名：  分子式：C12H16O4    Humandesmogleins1,DGS-E1ELISA試劑盒人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Ginsenoyne K  141947-42-4  中文名：  分子式：C17H24O3    組織MAPKAPKINASE5激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Panaxydiol  63910-76-9  中文名：  分子式：C17H24O2    HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Falcarinol  21852-80-2  中文名：  分子式：C17H24O    兔子神經營養因子4(-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基單鹽

L-Glutamic acid γ-(3-carboxy-4-nitroanilide) ammonium salt

其他L-Glutamic acid 5-(3-carboxy-4-nitroanilide) ammonium salt

產品規格：BR,99%

包裝：250毫克

CAS號：63699-78-5

C12H12N3O7NH4=328.28

級別：BR

Glupa-carboxylate：≥99.0%(HPLC)

Glupa-carboxylate free acid(enzymatically) ：≥87.0%

熔點：170～180℃

摩爾旋光度：+32±2o

PH：4.0～6.0

性狀：至黃色結晶粉末

用途：生化研究

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