酶聯免 疫吸附試驗(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結合專一性進行免 疫反應的定性和定量檢測方法。它是應用多的一種免 疫酶技術。ELISA試劑盒(ELISAKits)已成為藥 物和植物病理學研究中的常用診斷工具,是檢測組織提取液、血清和細胞培養液中目標抗體/抗原的理想工具,也是重要的質量控制手段。
ELISA主要實驗原理:
1、包被:抗原或者抗體能以物理性吸附于固相載體表面,原因是蛋白質和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗體反應等免 疫活性;
2、標記:抗原或者抗體可通過共價鍵與酶連接成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免 疫活性和酶的催化特點;
3、顯色:酶結合物與相應包被在固相載體的抗原或者抗體結合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現顯色反應,根據反應的顏色深淺可計算抗原或者抗體的相對含量。