公司產(chǎn)品僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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H2-K1人組織相容性2-K1-K區(qū)ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱
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human Histocompatibility 2-K1-K region，H2-K1 ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH096324
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包裝規(guī)格：液體盒裝 96T/48T
保存條件：2-8℃（長(zhǎng)期不使用時(shí)，部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下）。
有效期：6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸：低溫避光，請(qǐng)勿重壓，輕拿輕放（現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。）
Elisa試劑盒可測(cè)種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床。
樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板：一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔)，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本收集及儲(chǔ)存：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管，在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本：
室溫血液自然凝固 20 min 后，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），保存過(guò)程中如有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心，避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本：
將全血收集到含抗血凝劑的管中，根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA，檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合 20 min，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒棕褐小單孢菌Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb (Alexa Fluor®647 Conjugate)
人半胱天冬酶3(CASP3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒猴頭Phospho-NF-kappaB p105 (Ser933) Blocking Peptide
人組織蛋白酶B(CTSB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒FrigoribacteriumPhospho-IKK-alpha/beta (Ser176/180) Blocking Peptide
人組織蛋白酶V(CTSV)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸桿菌β-Actin Blocking Peptide
人單核趨化蛋白1(MCP-1)酶聯(lián)疫吸附測(cè)定試劑盒枯草芽胞桿菌Phospho-Bad (Ser112) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒菊異莖點(diǎn)霉Phospho-GSK-3α (Ser21) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蒼黃鏈霉菌CD38 (HIT2) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)
人調(diào)節(jié)正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES)酶聯(lián)附測(cè)定試劑盒 假單孢菌IDO (D5J4E?) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人單核趨化蛋白3(MCP-3)酶聯(lián)附測(cè)定試劑盒大腸埃希氏菌Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人嗜酸粒趨化因子(ECF/CCL11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒三葉草根瘤菌Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)酶聯(lián)測(cè)定試劑盒委內(nèi)瑞拉鏈霉菌β-Tubulin Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)附測(cè)定試劑盒紅色紅曲菌 Cytochrome c Blocking Peptide
人二級(jí)組織趨化因子(SLC)酶聯(lián)附測(cè)定試劑盒冬蟲夏草COX IV Blocking Peptide
人巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC)酶測(cè)定試劑盒莫哈韋芽孢桿菌Mre11 Blocking Peptide
人髓樣前體抑制因子2(MPIF2)酶聯(lián)附測(cè)定試劑盒海洋桿菌PU.1 Blocking Peptide
H2-K1人組織相容性2-K1-K區(qū)ELISA檢測(cè)試劑盒2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgG ELISA KitⅡ型膠原（Col Ⅱ）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體Human OTUD5(OTU domain containing 5) ELISA Kit促甲狀腺素（TSH）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
激活素受體1B抗體Human MARK2 ELISA KitCBZ-L-丙氨酸
雄**受體相關(guān)蛋白24抗體Human MARK3 ELISA Kit小鼠心鈉肽（ANP）ELISA試劑盒,
淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）Human MARK1 ELISA KitEB病IgM（EBv IgM）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
腺苷酸環(huán)化酶2抗體Human MARK4 ELISA Kit糖皮質(zhì)**受體α（GR-α）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
載脂蛋白C3抗體Human MARS ELISA Kit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2（IGFBP-2）ELISA試劑盒,
載脂蛋白E4抗體Human MARVELD2 ELISA Kit小鼠泛素蛋白（Ub）ELISA試劑盒,
操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記抗體工作液）100μl，37℃，60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
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