訂購信息：

產品名稱：鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法

英文名稱：Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR
貨號：BJ-01R3211

產品規格：50T

運輸：低溫

保存：負20度

有效期：一年

貨期：現貨

-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】：

u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；

u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；

u 運輸：采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。

【自備試劑】:

核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

1、 酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二：RT（逆轉錄）反應合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應體系（20 μL 體系）

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），

反應終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。

實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括量和相對定量）和定性分析。

主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

泰樂菌素單克隆抗體 小鼠單抗 1

紅霉素檢測試劑盒 小鼠單抗 0.1

慶大霉素單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

頭包類**單克隆抗體 小鼠單抗 0.5

頭包啦啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.5

頭包噻呋單克隆抗體 小鼠單抗 0.5

已烯雌酚單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

雌二醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

雌三醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.05

HRP標記雌三醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.05

甲基睪酮單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

喹乙醇單克隆抗體 小鼠單抗 1

蘇丹紅單克隆抗體 小鼠單抗 0.1

三聚氰胺單克隆抗體 小鼠單抗 1

賽庚啶多克隆抗體 兔多抗 0.1

地塞米松多克隆抗體 兔多抗 0.5

金剛烷胺多克隆抗體 兔多抗 10

B1檢測試劑盒 小鼠單抗 0.025

M1檢測試劑盒 小鼠單抗 0.05

哥倫比亞血瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于營養要求高的分離、培養和溶血試驗

Columbia Blood Agar

巧克力瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養

Chocolate Agar

伊紅美藍瓊脂平板（9cm） 10個/包 弱選擇性培養基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌

Eosin-Methylene Blue Agar

SS瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養

Salmonella Shigella Agar

HE瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于沙門氏菌的選擇性分離培養

Hektoen Enteric Agar

XLD培養基平板（9cm） 10個/包 選擇性培養基，主要用于分離志賀氏菌屬，亦可用于分離沙門氏菌

Xylose Lysine Desoxycholate Medium

亞硫酸鉍瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于沙門氏菌的選擇性分離

Bismuth Sulfite Agar

中國藍瓊脂平板（9cm） 10個/包 弱選擇性培養基，用于腸道致病菌的選擇性分離

China Blue Agar

麥康凱瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于腸道致病菌的選擇性分離、培養

MacConkey Agar

鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法山梨醇麥康凱瓊脂（SMAC）平板（9cm） 10個/包 用于大腸桿菌O157的分離培養

Sorbitol Maconkey Agar Base

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于大腸菌群的固體平板檢測

Violet Red Bile Agar

品紅亞硫酸鈉瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于飲用水、水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證

Fuchsin Basic Sodium Sulfide Agar

MFC瓊脂平板（9cm） 10個/包 用于大腸菌群的濾膜法檢測

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的**量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在學中zui小檢出率為3個。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

產品留言

標題

聯系人

聯系電話

內容

驗證碼

點擊換一張

注：1.可以使用快捷鍵Alt+S或Ctrl+Enter發送信息!
2.如有必要,請您留下您的詳細聯系方式!