微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
基本信息:
產品名稱:曲霉培養
拉丁文: Aspergillus│sp.
分離基物: 土壤
提供形式: 凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
培養基: 0014
生長條件: 28℃
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
培養方法:
培養基 0012
生長條件 28℃
存儲條件 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
培養及打管說明:
1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復培養:用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基,滴入安瓿管內,輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養基試管中,并在建議的條件下培養。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環境下,某些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續兩次繼代培養才能正常生長
4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

保藏方法:
1. 傳代培養保藏法
又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(后者作保藏厭氧**用),培養后于4-6℃冰箱內保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。
胃蛋白酶原C蛋白抗原 Pepsinogen C peptide 進口/國產 規格: 0.5mg
Smad 7(多肽) Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7) 進口/國產 規格: 0.5mg
CIDEB抗原 CIDEB peptide 進口/國產 規格: 0.5mg
胰島素受體(抗原) Insulin Receptor(ISR) 進口/國產 規格: 0.5mg
人癌胚抗原 CEA 進口/國產 規格: 0.5mg
基質細胞衍生因子-1(抗原) SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 進口/國產 規格: 0.5mg
三聚氰胺偶聯雞卵白蛋白 Melamine/OVA 進口/國產 規格: 1mg
胰胨大豆胨固綠瓊脂 進口、國產 用于濾膜細總數的測定和分離培養(NEOGEN方法) Tryptic Soy Fast Green Agar 250
BPLS瓊脂 進口、國產 用于各種標本中沙門氏選擇性分離培養(Merck方法) BPLS Agar 250
曲霉培養Rabbit Anti-Monkey IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗猴IgG 0.1ml
CD64/IGFR1 球蛋白G Fc段受體I 0.1ml
Heamachrome 血紅素抗體 0.2ml
Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) 磷酸化酪氨酸羥化酶抗體 0.1ml
MAGP2 纖微絲相關糖蛋白2抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Cy7 Cy7標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml
GABA 兔抗γ1氨基丁酸抗體 0.2ml
SREBP-2 膽固醇調節元件結合蛋白2抗體 0.1ml
PPAP2A 磷酸脂磷酸水解酶1抗體 0.1ml
IL-5 白細胞介素5抗體 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgM/FITC FITC標記的羊抗小鼠IgM 0.3ml
Phospho-MSK1 (Ser212) 磷酸化有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗人IgG 0.1ml
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