【友情提示】：本產品僅供科研研究使用，不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

產品名稱：維生素B6（VB6）含量測定試劑盒
規格：詳見說明
測試方法：詳見說明
客戶自備儀器和試劑：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點：
       1、優化設計的實驗方案，1小時即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測。
2、組織：按照組織質量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。
4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。
拓撲替康羧酸鈉鹽 Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt 123949-08-6 質量規格：美國進口  

拓撲替康 Topotecan 123948-87-8 質量規格：美國進口  

15-酮基氟前列醇異丙酯 15-keto Fluprostenol isopropyl ester 404830-45-1 質量規格：美國進口  

曲唑酮鹽酸鹽-d6 Trazodone-d6 Hydrochloride 1181578-71-1 質量規格：美國進口  

N-氧基曲唑酮 Trazodone N-Oxide 55290-68-1 質量規格：美國進口  

4'-羥基鹽酸曲唑酮 4'-Hydroxy Trazodone HCl 53818-10-3 質量規格：美國進口  

鹽酸伐倫克林標記15N3 Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3 230615-23-3 (unlabeled) 質量規格：美國進口  

內酰胺伐倫克林 Varenicline Lactam 873302-30-8 質量規格：美國進口  

羥基伐倫克林 Hydroxy Varenicline 357424-21-6 質量規格：美國進口  

N-甲酰伐倫克林 N-Formyl Varenicline 796865-82-2 質量規格：美國進口  

N-葡萄糖苷伐倫克林 Varenicline N-Glucoside 873302-31-9 質量規格：美國進口  

伐倫克林氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸 Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide 535920-98-0 質量???格：美國進口  

去乙酰基長春瑞濱 Deacetyl Vinorelbine 126347-74-8 質量規格：美國進口  

酒石酸長春瑞濱水合鹽 Vinorelbine ditartrate salt hydrate 125317-39-7 (anhydrous) 質量規格：美國進口  

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操作步驟(僅供參考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩定，使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍，使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品：  
a,細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織進行裂解，可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液，如果有必要需進行適當勻漿，低速離心取上清，-70℃凍存，用于CAT的檢測。  
b,血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規方法制備，用生理鹽水10倍稀釋后， 可以直接用于本試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定，-70℃凍存，用于CAT的檢測。  
c,全血樣品：收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內，顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次，用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液：用抗凝管收集血液，顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min，棄上清，沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。  
e,高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度，以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。  
3、 CAT檢測：按照下表設置空白管、自身對照管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并 注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度，分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計，亦可用酶標儀檢測，但如果有條件，盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零，讀取各管吸光度值。一般應數小時內檢測完畢。

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