【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:線粒體呼吸鏈復合物 Ⅳ 活性測試盒
規格:20管/10樣
測試方法:生化法
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
A激酶錨定蛋白5抗體英文名稱:AKAP5 0.2ml 轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒 TTR ELISA Kit
果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體英文名稱:alpha-L-arabinofuranosidase 1ml 乳鐵蛋白(LTF)ELISA試劑盒 LTF ELISA Kit
胰羧肽酶A1抗體英文名稱:CPA1 0.1ml 核轉錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒 NFκB ELISA Kit
C型凝集素結構域家族1成員A抗體英文名稱:CLEC1/CLEC1A 0.2ml 組蛋白脫乙酰基酶11(HDAC11)ELISA試劑盒 HDAC11 ELISA Kit
泛素特異性蛋白酶9X抗體英文名稱:USP9X 0.2ml
EYA4蛋白抗體英文名稱:EYA4 0.2ml 矢車菊苷δ2(CENTδ2)ELISA試劑盒 CENTδ2 ELISA Kit
谷氨酸受體3抗體英文名稱:Glutamate receptor 3 0.1ml 巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒 MCSF ELISA Kit
同源盒蛋白HOXD10抗體英文名稱:HOXD10 0.2ml 非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶6(PTPN6)ELISA試劑盒 PTPN6 ELISA Kit
肥大細胞類糜蛋白酶1抗體英文名稱:Mast Cell Chymase 0.1ml Ⅰ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 CTXⅠ ELISA Kit
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體英文名稱:phospho-MEK5(Ser129) 0.1ml
天冬氨酸蛋白酶ASP4抗體英文名稱:ASP4 0.2ml
前動力蛋白2抗體英文名稱:PROK2 0.2ml
核蛋白相互作用蛋白1抗體英文名稱:SRP1 0.2ml
PEST含核蛋白抗體英文名稱:PCNP 0.2ml
硫酸酯酶2蛋白抗體英文名稱:Sulfatase 2 0.2ml
APC標記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/APC 0.1ml
線粒體呼吸鏈復合物 Ⅳ 活性測試盒茶堿 ;Theophylline 58-55-9 100mg 訂購|咨詢
刺五加葉中;Hederasaponin 36284-77-2 20mg 訂購|咨詢
長梗冬青苷;Pedunculoside 42719-32-4 20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷Ⅶ;Polyphyllin VI 76296-75-8 20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷Ⅵ;Polyphyllin VI 55916-51-3 20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷II;Chonglou Sapo 76296-72-5 20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷I;Chonglou Sapon 50773-41-6 20mg 訂購|咨詢
粗莖烏頭堿甲;Crassicauline 79592-91-9 20mg 訂購|咨詢
橙黃Ⅳ;Orange IV 554-73-4 20mg 訂購|咨詢
橙黃Ⅱ;Orange Ⅱ 633-96-5 20mg 訂購|咨詢
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時內檢測完畢。
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