Thermo 正相色譜柱使用和維護說明

發布時間：2018-08-28

1 、適用鍵合相
正相色譜柱鍵合相包括：Amino、Silica、Cyano 等。
2 、柱體積
色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算：
V 為色譜柱柱體積（mL），r 為色譜柱內徑（cm），L 為色譜柱長度（cm）。
3 、色譜柱柱效測試與保存
反相色譜柱出廠時都經過柱效測試，所用化合物為甲苯、鄰-硝基苯胺、對-硝基苯胺、
間-硝基苯胺和硝基苯，如有不同，以柱效報告為準。
在條件允許情況下，請對新色譜柱進行柱效測試。
正相色譜柱出廠時均保存在正辛烷-乙醇溶液中（如有不同，以柱效報告上列明為準）。
4 、溫度
所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于 60℃。
5 、樣品
* 好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解
在初始流動相或極性相近的溶劑中。
樣品溶液不應含有任何顆粒物，* 好使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在
色譜系統中使用在線過濾器。
樣品溶液如果使用強溶劑（例如，流動相為正己烷，樣品溶劑為乙醇），為達到較好峰
形，需要降低進樣量（以 250x4.6mm 規格為例，小于 10μL）。
6 、流動相
正相色譜所用溶劑通常為氯仿、正己烷、乙腈、甲醇、乙醇等。嚴禁使用與色譜柱保存
溶液不互溶的溶劑作為流動相。
對于某些特殊的應用（例如親水相互作用色譜），要使用與色譜柱保存溶劑不互溶的溶
劑（例如水）作為流動相時，須使用 20 倍柱體積的異丙醇沖洗色譜柱后，方可使用流動相
進行平衡。
所有流動相，* 好當日實驗當日配制，并使用 2μm 濾膜過濾。
7 、色譜柱安裝
請小心操作色譜柱。
不要摔、碰色譜柱，這樣會損壞色譜柱床，使色譜柱性能下降。
使用合適的連接管路和接頭，確保色譜柱連接處死體積降到* 低（使用不銹鋼接頭時需
要尤其注意）。我們建議使用 SLIPFREE 接頭，此接頭與 Thermo 色譜柱以及其他品牌色譜
柱均完美匹配。
8 、色譜柱平衡
在進行分析之前，請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱，以使色譜柱達到平衡。
Version 2
若需使用與色譜柱保存溶液不互溶的溶劑作為流動相，請在平衡前使用至少 20 倍柱體
積的異丙醇沖洗色譜柱。
9 、色譜柱保護
對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品，請盡量使用在線濾器或保護柱，如果可能，使
用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
10 、色譜柱清洗
常規清洗：
在儲存色譜柱之前，請用強的溶劑沖洗色譜柱（去除強保留成分，正相色譜柱中通常使
用乙醇），然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
清洗強保留污染物：
如果色譜柱柱效出現大幅下降，且柱效下降可能由于強保留物質聚積所導致時，使用如
下試劑依次清洗色譜柱
20 倍柱體積正己烷；
20 倍柱體積異丙醇；
20 倍柱體積乙腈；
20 倍柱體積水；
20 倍柱體積乙腈；
20 倍柱體積異丙醇；
20 倍柱體積正己烷。
11 、色譜柱保存
正相相色譜柱，保存溶劑通常是含乙醇的正己烷，也可在常規清洗后直接保存在乙醇中。
如果需要長時間儲藏，則需要注意色譜柱密封，避免保存溶液揮發。
注意：如果違反上述規程，可能使色譜柱失去保修。

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