如何選擇合適的亞三微米色譜柱
2.×μm UHPLC色譜柱
要完全實現UHPLC色譜柱的更高柱效,就必須讓液相系統的擴散效應對色譜柱的影響盡可能小。小顆粒色譜柱,會讓色譜峰更窄更尖銳,提高分離度;但是,更窄的色譜峰,對柱外擴散體積更為敏感。因此,根據系統的擴散體積,匹配合適的色譜柱規格,對于實現分離性能至關重要。
如何選擇合適的亞三微米色譜柱?
根據如下四步驟加以考慮:
色譜填料/鍵合相的選擇性與耐受性:滿足目標應用的需要;
色譜柱長與粒徑的比值L/dp:色譜柱的柱效水平是否滿足目標應用的分離度需求;
柱長L與粒徑dp對柱壓的影響:考慮色譜柱運行柱壓,是否能兼容您的液相系統;
色譜柱內徑:對于擴散體積較大的系統,選擇4.6 mm內徑,可以減少系統對柱效的影響程度。
色譜柱規格選擇指導
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系統 |
HPLC |
UHPLC |
UPLC |
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擴散體積測量值 |
>40μL |
22-29μL |
<20μL |
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常規操作壓力 |
<4000 psi |
<10,000 psi |
<18,000 psi |
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色譜柱粒徑 |
3-5μm |
2-3μm |
<2μm |
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色譜柱內徑 |
4.6 mm (3.0 mm) |
3.0mm (2.1mm) |
2.1mm (1.0 mm) |
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色譜柱長度 |
75-250mm |
50-100mm |
≤150mm |
以上根據Waters LC系統來推薦色譜柱規格。
對任何LC系統都適用的柱規格
在轉移LC方法時,儀器譜帶展寬是需要確定的十分關鍵的LC儀器參數之一。了解譜帶展寬,能幫助色譜分離化學家所開發的方法,兼容任何一臺LC系統。如下色譜柱規格表,基于儀器譜帶展寬名義測量值。
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系統 |
LC技術 |
譜帶展寬* |
推薦色譜柱的粒徑與內徑 |
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Shimadzu Prominence UFLC |
HPLC |
41μL |
XBridge 3.5, 5μm; XSelect 3.5, 5 μm; CORTECS 2.7 μm 3.0–4.6 mm I.D. |
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Alliance 2695 HPLC |
HPLC |
29 μL |
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Agilent 1260 UHPLC (600 bar) |
HPLC |
28 pL |
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Thermo Accela UHPLC |
HPLC |
21μL |
XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm; CORTECS 2.7 μm 3.0 mm I.D. |
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Agilent 1290 UHPLC (1200 bar) |
UHPLC |
17 μL |
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ACQUITY Arc |
UHPLC |
23 μL |
XBridge 2.5, 3.5, 5 μm; XSelect 2.5, 3.5, 5 μm; ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm, CORTECS 2.7 μm 3.0 mm I.D. |
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ACQUITYUPLC |
UHPLC |
12 μL |
ACQUITY UPLC BEH 1.7 μm; ACQUITY UPLC CSH 1.7 μm; ACQUITY UPLC HSS 1.8 μm, CORTECS 1.6 μm 2.1 mm I.D. |
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ACQUITY UPLC H-Class W/Column Manager |
UPLC |
12 μL |
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ACQUITY UPLC H-Class |
UPLC |
9μL |
*這些測量數值基于未經調整的儀器,僅作為參考。對于系統的泵、管路連接、以及儀器參數的任何調整,都會改變該儀器的譜帶展寬。



