服務(wù)描述：

公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨：

客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

保存和應(yīng)用：

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
甲磺酸齊拉西酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ziprasidone mesilate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠絨毛膜促性腺β(β-CG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-CG ELISA Kit

鹽酸美利曲辛（標(biāo)準(zhǔn)品）  Melitracen   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒 ，英文名： LZM ELISA Kit

咪唑斯汀（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mizolastine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠溶酶體酸性0酸酶2(ACP2)ELISA試劑盒 ，英文名： ACP2 ELISA Kit

地氯雷他定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Desloratadine  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 小鼠溶血0脂酸受體3(LPAR3)ELISA試劑盒 ，英文名： LPAR3 ELISA Kit

糠酸莫米松（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mometasone Furoate  質(zhì)量規(guī)格：鑒別 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 ，英文名： LDH ELISA Kit

鹽酸戊乙奎醚（標(biāo)準(zhǔn)品）  Penehyclidine   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLactoferrin,LTF/LFELISAkit 96T/48T

3-奎寧醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  3-quinuclidinol  質(zhì)量規(guī)格：檢查用 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit

普伐他汀四甲基丁胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T

鹽酸伊托必利（標(biāo)準(zhǔn)品）  Itopride   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 ，英文名： PEDF ELISA Kit

福辛普利鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fosinopril   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： CT IgG ELISA Kit
小鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)ELISA試劑盒 ，英文名： HSF1 ELISA Kit 雙氯芬酸鉀（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diclofenac Potassium  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)ELISA試劑盒 ，英文名： HSF4 ELISA Kit 依西美坦（標(biāo)準(zhǔn)品）  Exemestane  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠絨毛膜促性腺(CG)ELISA試劑盒 ，英文名： CG ELISA Kit 鹽酸曲美他嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）  Trimetazidine   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠絨毛膜促性腺β(β-CG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-CG ELISA Kit 甲磺酸齊拉西酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ziprasidone mesilate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒 ，英文名： LZM ELISA Kit 鹽酸美利曲辛（標(biāo)準(zhǔn)品）  Melitracen   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠溶酶體酸性0酸酶2(ACP2)ELISA試劑盒 ，英文名： ACP2 ELISA Kit 咪唑斯汀（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mizolastine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

小鼠溶血0脂酸受體3(LPAR3)ELISA試劑盒 ，英文名： LPAR3 ELISA Kit 地氯雷他定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Desloratadine  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定

小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 ，英文名： LDH ELISA Kit 糠酸莫米松（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mometasone Furoate  質(zhì)量規(guī)格：鑒別

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseLactoferrin,LTF/LF 96T/48T 鹽酸戊乙奎醚（標(biāo)準(zhǔn)品）  Penehyclidine   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit 3-奎寧醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  3-quinuclidinol  質(zhì)量規(guī)格：檢查用
Primarker?人胃MatchPair?鑒定試劑盒實(shí)驗(yàn) 規(guī)格6次/盒

Primarker?人胰腺細(xì)胞MatchPair?鑒定試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格6次/盒

Primarker?人直腸MatchPair?鑒定試劑盒培養(yǎng) 規(guī)格6次/盒
PrimaCell?人肝癌組織源細(xì)胞試劑盒保存注意事項(xiàng)：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精（建議配置75%的酒精的水是過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

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