培養方法

傳代方法 將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養；

生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養液。CM1-1培養液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。

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培養操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片完全浸在培養液中； 

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

產品介紹 PRE7 is a subunit of the Yeast proteasome. The yeast proteasome seems to be composed of 14 different subunits which form a highly ordered ring-shaped structure. The proteasome degrades poly-ubiquitinated proteins in the cytoplasm and in the nucleus. It is essential for the regulated turnover of proteins and for the removal of misfolded proteins.

Function : Catalyzes the synthesis of phosphoribosylpyrophosphate(PRPP) that is essential for nucleotide synthesis.

Subunit : Homodimer. The active form is probably a hexamer composedof 3 homodimers

Tissue Specificity : Testis.

Similarity : Belongs to the ribose-phosphate pyrophosphokinasefamily.

英文名稱  Anti-recPEP

中文名稱  重組豬乙腦結構蛋白抗體

濃    度  1mg/1ml

規 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Japaneseencephalitisvirus  

產品類型  一抗    

研究領域  學 及  

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from recombind Japanese encephalitis virus envelope protein  

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A
原代雪旺細胞培養體系幽門螺桿菌素相關基因蛋白A-IgG檢測試劑盒芐基基氫氧化銨 20%甲溶液隱丹參酮 98%

氧鯊烯環化酶檢測試劑盒芐基基氫氧化銨 25%水溶液二氫丹參酮  分析標準品，≥98%

細小病B19檢測試劑盒芐基基氫氧化銨 40%甲溶液丹參酚酸B 分析標準品，≥98%

受體相互作用蛋白3檢測試劑盒芐索氯銨 97%丹參酮IIA磺酸鈉 分析標準品，≥98%

踝蛋白檢測試劑盒N-甲基吡咯烷酮 電子級,99.9%丹參素鈉 分析標準品，>98.5%

新嘌呤檢測試劑盒二酸 AR,99.5%丹參素鈉 98%

N（ε）羧乙基賴氨酸檢測試劑盒沒食子酸甲酯 98%丹參酮I  分析標準品，≥98%

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應該為玻璃**，并經過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。