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產品資料

小鼠肺動脈外膜成纖維細胞

小鼠肺動脈外膜成纖維細胞
  • 如果您對該產品感興趣的話,可以
  • 產品名稱:小鼠肺動脈外膜成纖維細胞
  • 產品型號:BH-8010809
  • 產品展商:博湖
  • 產品文檔:無相關文檔
簡單介紹
收到小鼠肺動脈外膜成纖維細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
產品描述

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小鼠肺動脈外膜成纖維細胞

電詢

BH-8010809

培養方法

傳代方法 將舊培養液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養箱消化,約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養;

生長條件 37℃,5%CO2,CM1-1培養液。CM1-1培養液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培養液,含谷氨酰胺,含丙酮酸鈉。

存儲條件 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉移至液氮中保存。

培養操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中; 

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 


實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應該為玻璃**,并經過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養方法:

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

DISEASE : Defects in HCRT are the cause of narcolepsy type 1 (NRCLP1) [MIM:161400]. Narcolepsy is a neurological disabling sleep disorder, characterized by excessive daytime sleepiness, sleep fragmentation, symptoms of abnormal rapid-eye-movement (REM) sleep, such as cataplexy, hypnagogic hallucinations, and sleep paralysis. Cataplexy is a sudden loss of muscle tone triggered by emotions, which is the most valuable clinical feature used to diagnose narcolepsy. Human narcolepsy is primarily a sporadically occurring disorder but familial clustering has been observed. Note=Human narcolepsy is associated with a deficient orexin system. Orexins are absent and/or greatly diminished in the brain and cerebrospinal fluid (CSF) of most narcoleptic patients.

Similarity : Belongs to the orexin family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: O43612.1

英文名稱  Anti-OTX1

中文名稱  轉錄因子OTX1抗體

     Homeobox protein OTX 1; Homeobox protein OTX1; MGC15736; Orthodenticle 1; Orthodenticle homeobox 1; Orthodenticle homolog 1; Orthodenticle1; Otx 1; otx1; OTX1_HUMAN.

     1mg/1ml

 0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

產品類型  一抗    

研究領域  神經生物學 信號轉導 轉錄調節因子  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 37kDa

     Lyophilized or Liquid

 KLH conjugated synthetic peptide derived from human OTX1 (1-100aa)

     IgG

純化方法  affinity purified by Protein A
小鼠肺動脈外膜成纖維細胞雌**檢測試劑盒原卟啉 95%2-氯-5-甲酸 99%

雌**受體檢測試劑盒聚烯酸 平均分子量M.W ~1,800 2-氯二苯甲酮 99%

雌**受體檢測試劑盒聚烯酸 平均分子量M.W ~450,0004-氯-4'-羥基二苯甲酮 98%

紅**素檢測試劑盒液體石蠟 色譜固定液,80℃二苯 99%

促紅**素抗體檢測試劑盒液體石蠟 分子生物學級4,4'-二氯二苯甲酮 99%

促紅**素受體檢測試劑盒液體石蠟 包埋級2,4-二羥基二苯甲酮 99%

促黃體**檢測試劑盒正十二烷基苯 分析標準品,≥99.5% (GC)4,4'-二羥基二苯甲酮 98%


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