鼻疽伯克霍爾德氏菌PCR檢測試劑盒說明書
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
樣本：血清 血漿 組織勻漿等液體樣本。
標記物：血清 血漿 組織勻漿等。
應用：僅用科研實驗檢測定量，定性檢。
檢測方法：夾心法
技術要求：全程按說明書步驟檢測，操作規范，專業，儀器設備齊全。
規格：48t/96t
性狀：液體
運輸方式：快遞發貨
有效期：6個月品
特點：靈敏性高，---性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購的產品。
使用范圍：此產品供科研實驗使用，不得用于---。
用途：用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。
特點優勢：
1.實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
2.特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對**種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
3.靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中**的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
5.優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
試劑盒組成及試劑配制：
1.酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2.標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3.樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4.sws標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物su標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7.辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4.細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
每個樣品測試反應體系配制見下表 2。
表 2 每個樣品測試反應體系配制表
注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。