原代細胞實驗步驟:
以胚胎小鼠為例 1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行,即消化法和組織塊培養法。 4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養基,放入培養瓶中培養。 注:細胞分離的方法各實驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質酶等)。 5.若進行組織塊培養,則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉倒置后在37℃培養箱內放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉過來,從邊角加入4~5mL培養基,使細胞接觸到培養基,放培養箱內繼續進行培養。
組織來源
人臍帶組織
貨號
P-X1497
產品規格
5×105
生長特性
貼壁
產品類別
人原代細胞
細胞形態
梭形細胞 不規則細胞
細胞詳述:
臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在中,動脈在胎盤的母體部分出的,與胎盤的子體部胎兒靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行 CO 2 和 O 2 ,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤,臍靜脈將 O 2 和營養物質從胎盤運送給胎兒。
臍帶間充質干細胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞,它能分化成許多種組織細胞,并且具有取材方便,無倫理學爭議等優點,因此越來越受到研究工作者們的關注。
細胞特性:
1) 細胞來源于人臍帶組織。
2) 細胞鑒定: CD44熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于 90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。
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注意事項:
1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。