細胞角蛋白3+12抗體
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貨號
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規格
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價格
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用途
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BJ005288
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50ul
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1380
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僅供科研實驗
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BJ005288
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100ul
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2380
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僅供科研實驗
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BJ005288
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200ul
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3480
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僅供科研實驗
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商品屬性：
英文名稱：Cytokeratin 3+12
中文名稱：細胞角蛋白3+12抗體
別 名；CK 12; CK 3; CK12; CK3; Cytokeratin 12;
Cytokeratin 3; K12; K3; keratin 12 (Meesmann corneal dystrophy); Keratin 12;
Keratin 3; Keratin, type I cytoskeletal 12; Keratin, type II cytoskeletal 3;
KRT12; KRT3; 65 kDa cytokeratin.
研究領域； 細胞生物 信號轉導 轉錄調節因子 細胞類型標志物
抗體來源；Rabbit
克隆類型；Polyclonal
交叉反應；Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, )
產品應用；WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 （石蠟切片需做抗原修復）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量；65+54kDa
細胞定位；細胞漿 細胞膜 細胞外基質
性 狀；Liquid
濃 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Cytokeratin 3+12
亞 型；IgG
純化方法；affinity purified by Protein A
保存條件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項；This product as supplied is
intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic
applications.
一抗操作步驟：
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉：?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質結合位點與抗體結合，?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質或非離子去污劑來封閉膜上的未結合位點，?以降低抗體的非特異性結合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉，?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動1～2小時，?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進行洗膜，?以去除膜上未結合的封閉試劑。?
一抗孵育：?在一抗孵育之前，?需要參考一抗的說明書，?按照適當比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后，?立即加入稀釋好的一抗，?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動孵育1～2小時。?如果一抗孵育一小時效果不佳，?可以在4℃緩慢搖動孵育過夜。?然后回收一抗，?加入Western洗滌液，?在搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘，?共洗滌3次。?如果結果背景較高，?可以適當延長洗滌時間并增加洗滌次數。?
洗滌：?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結合，?洗滌的效果直接影響結果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液，?其中的Tween20有助于去除非特異性的結合，?減少背景。?洗滌的次數和時間根據具體實驗來確定，?建議清洗3-5次，?每次5分鐘。?
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抗體注意事項：
確定抗體的名字和特性：?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息，?這些信息對于選擇正確的抗體至關重要。?
明確實驗類型：?了解你的實驗類型（?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS）?，?因為抗體的說明書通常會列出該抗體經驗證過的實驗類型。?如果說明書沒有提及某種應用類型，?并不意味著該抗體不適用于該實驗，?只是表示尚未經過該實驗驗證。?
選擇適當的實驗樣本種屬：?確定你的實驗樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等，?因為抗體的說明書會列出該抗體經試驗驗證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結構性質：?了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇的抗體，?特別是當樣本蛋白在提取和處理過程中可能會變性時，?這會影響抗體的親和反應。?
單多克隆抗體的選擇：?單克隆抗體特異性強但親和力相對小，?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強。?根據實驗需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性：?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應選擇針對已充分表征的原產生的抗體，?避免使用不合適或質量差的原產生的抗體。?
封閉液的選擇：?封閉液的選擇應根據抗體說明書進行????常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結合位點，?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項：?使用干凈的孵育盒子，?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號。?如果一次性需要檢測多個蛋白，?可以考慮將膜剪開或采用其他技術如抗體洗脫液處理后再次使用膜
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