操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標法、高液相色譜法,自主**,技術**團隊,操作簡便快捷,規格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
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產品名稱
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測定方法
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規格
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貨號
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轉氫酶1生化試劑盒(微量法)
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微量法
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100管/96樣
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BJ-01611136-100管/96樣
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商品介紹:
測定意義:TH位于線粒體的內膜上,又稱為呼吸電子傳遞鏈復合體六,催化NADH+NADP+和 NAD++NADPH相互轉化。催化正向反應稱為TH-1。線粒體NADH含量增加時會導致線粒體膜的H+電化學梯度升高,因而促進了電子傳遞鏈上ROS的產生。TH-1促進NADH轉換為NADPH,從而提高線粒體的抗氧化能力。測定原理:NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代NADP+,TH-1催化 APADP+還原**的APADPH在375nm有特征光吸收,因此通過測定375nm光吸收增加速率,來計算TH-1活性。需自備的儀器和用品:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8 總SOD活性檢測試劑盒(WST-8法) 100次
核轉位分析試劑盒(單分子轉位)(FM法) 100T
SIS3 Smad3抑制劑(SIS3) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒 50T
一氧化碳血紅蛋白檢測試劑盒(比色法) 50T
Hemoglobin test solution 血紅蛋白測試液(HICN比色法) 1ml/35樣
自噬檢測試劑盒(熒光顯微鏡,MDC法) 100T
顯影定影試劑盒 1盒
Aminophylline 非磷酸二酯酶抑制劑(Aminophylline) 1mL(10mM)|100mg|500mg
Pargyline hydrochloride MAO抑制劑(Pargyline hydrochloride) 1mL(10mM)|500mg
Mycro 3 c-Myc抑制劑(Mycro 3) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
AZM475271 Src激酶抑制劑(AZM475271) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Icilin TRPM8離子通道激動劑(Icilin) 1mL(10mM)|10mg|50mg
GW0742 高度PPARδ激動劑(GW0742) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
轉氫酶1生化試劑盒(微量法)植物滲調蛋白(Osmotins)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 氣管平滑肌細胞完全培養基100mL
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 氣管上皮細胞完全培養基100mL
犬內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 髂動脈內皮細胞完全培養基100mL
人血管內皮生長因子A(VEGF-A)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺癌細胞英文名稱:22RV1
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺癌細胞英文名稱:DU 145
小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺癌細胞英文名稱:PC-3
大鼠肌球蛋白輕鏈磷酸酶(MLCP)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺成纖維細胞完全培養基100mL
雞**球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺成纖維細胞完全培養基100mL
人成骨生長肽(OGP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺平滑肌細胞完全培養基100mL
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺上皮細胞完全培養基100mL
人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 前列腺平滑肌細胞完全培養基100mL
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