喹諾酮類檢測卡使用說明書
(膠體金法)
1 喹諾酮類檢測卡原理及用途
本產品應用競爭抑制膠體金**層析的原理制成,用于檢測組織(魚蝦蟹、畜禽肉、內臟)、蜂蜜等樣本中的喹諾酮類**(Fluoroquinolones,QNs)。
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的喹諾酮類**與金標抗體相結合,從而阻止金標抗體與纖維素膜上喹諾酮類偶聯物結合。當樣本溶液中的喹諾酮類**含量大于檢測限時檢測線不顯色,結果為陽性;當樣本溶液中喹諾酮類代謝物含量小于檢測限時檢測線顯紅色,,結果為陰性。
2 喹諾酮類檢測卡技術指標
2.1 試劑卡靈敏度:以恩若沙星計2ppb(ng/ml)
對樣本的*終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
本試劑對喹諾酮類**的靈敏度如下:
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**名稱
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靈敏度ppb
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恩諾沙星
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2
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諾氟沙星
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1.5
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環丙沙星
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1.5
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氟甲喹
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3
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達氟沙星
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3
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培氟沙星
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4
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依諾沙星
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4
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噁喹酸
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10
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氧氟沙星(消旋體)
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4
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左氧氟沙星
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40
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2.2 樣本檢測下限:以恩若沙星計
動物組織、蜂蜜……………………0.2ppb
3 試劑盒組成
檢測卡…………………………50個/盒
樣本稀釋液……………………1瓶
說明書…………………………1份
4 喹諾酮類檢測卡需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20μl-200μl,100μl-1000μl
4.3 試劑:二氯甲烷、正己烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。
5.2動物組織、蜂蜜樣本處理方法
1)稱取4±0.05g均質樣本于50ML離心管中,加入4ML去離子水、8ML二氯甲烷,漩渦振蕩5分鐘,4000rpm離心5分鐘;
2)取下層液(二氯甲烷)6 mL至小燒杯中,于50~60 ℃下,利用氮氣或電吹風將有機溶劑吹干,得一固體殘渣。
3)加入300 μL 樣本稀釋液、600 μL正己烷,震蕩混合,以充分溶解固體殘渣。
4)以離心機3500 rpm離心10分鐘,取下層液待測
樣本濃縮倍數:10 檢測下限:0.2ppb(恩若沙星)
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應避免泡沫產生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內。
6.3室溫下放置8-10分鐘判斷結果, 30分鐘后無效。
7 結果判斷
陰性(-):C線、T線均顯色,表示樣品中喹諾酮類**濃度低于檢測限,或不含有。
陽性(+):C線顯紅色,T線不顯色,則表示樣品中喹諾酮類**濃度高于檢測限。
無效:未出現質控C線,表明操作過程不正確或檢測卡已失效。
8 喹諾酮類檢測卡注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開,打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5待檢樣品溶液需清亮、無混濁顆粒、無**污染,否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異常現象,從而影響實驗結果的判定。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環境下保存。
保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒。
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