禽流感H5亞型抗體檢測卡使用說明書
（膠體金法）
禽流感H5亞型抗體檢測卡【產品名稱】
通用名：禽流感H5亞型抗體檢測卡（膠體金法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus H5（GICA）
【包裝規格】 50T/盒、25T/盒
【預期用途】 禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟，是由A型禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病，以急性敗血性死亡到無癥狀帶毒為特征。
本試劑用于檢測禽類血清中禽流感H5亞型抗體，可用于**效果評價、輔助診斷等。
【原 理】
本試劑采用競爭性膠體金**層析試驗(GICA)原理制成，對于H5亞型的禽流感病毒抗體有很好的敏感性。樣本加入到加樣孔后與AIV抗原、膠體金標記物一起沿層析膜移動，若樣本中存在AIV-H5抗體則與膠體金標記物競爭AIV抗原，使檢測線不顯示紫紅色，若樣本中不存在AIV-H5抗體則產生顏色反應。
禽流感H5亞型抗體檢測卡【試劑盒組成】
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序號
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名稱
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50T/盒
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25T/盒
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1.
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檢測卡（含吸管）
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50個
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25個
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2.
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緩沖液
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1瓶
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1瓶
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3.
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說明書
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1份
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1份
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【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處（2-30℃），有效期24個月。
【樣本準備】
血清：按常規方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中，靜置約1小時待血液凝固后于4000轉/分鐘離心10分鐘（也可將血液靜置約2小時，待血液凝固自然析出血清），分離血清。要求血清清亮，無溶血、無污染。血清樣本短期可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
全血：可采用加抗凝劑的全血作為檢測樣本（全血樣本不能冷凍）。
禽流感H5亞型抗體檢測卡【試驗方法】
1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。
2.用配套吸管吸取已準備好的樣本，垂直而緩慢的滴加1滴（約25ul）到加樣孔內。
3.等待10分鐘后用裝有緩沖液的滴瓶滴加兩滴緩沖液到加樣孔。
4.室溫下放置10-15分鐘判斷結果，超過30分鐘的結果無效。
注意，過量加入樣本或緩沖液會出現錯誤結果。
禽流感H5亞型抗體檢測卡【結果判斷】
1.陰性：在觀察孔內，檢測線區（T）及對照線區（C）同時出現紫紅色線。意味著抗體水平低于HI滴度1:16。
2.陽性：在觀察孔內，只有對照線區（C）出現一條紫紅色線。意味著抗體水平等于或高于HI滴度1:32。
3.失效：在觀察孔內，對照線區（C）不出現色線。
本試劑的檢測閾值是HI試驗1:32。所以通過對被檢血清進行倍比稀釋，找到其呈現陽性的*大稀釋倍數，則可以得出抗體滴度。例如：將待檢血清用生理鹽水分別做1:2（一份血清加一份生理鹽水，往后依次類推）、1:4、1:8稀釋，然后將3份不同稀釋倍數樣本分別進行檢測，如1:2、1:4都呈陽性，而1:8呈陰性，則呈現陽性的*大稀釋倍數為1:4，那么此份樣本的*終抗體滴度為25（1:32）乘以22（1:4）等于27（1:128）。
【試驗結果的解釋】
對于**后的樣本，抗體水平的高低反映了**效果的高低。對于未經**的樣本，陽性結果表明可能有AIV-H5感染，需結合臨床及其他方法進行分析。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅用于檢測AIV-H5抗體水平。
禽流感H5亞型抗體檢測卡【注意事項】
1.試驗前請仔細閱讀說明書，本產品提供的各種試劑僅供本實驗用。
2.過期或鋁箔袋破損的產品，均不可使用。
3.檢測卡從冰箱中取出時應恢復到室溫后打開，打開的檢測卡應盡快使用以免受潮后失效。
4.去離子水、自來水、生理鹽水不能作為陰性對照。
5.待檢樣本應新鮮清亮，避免使用污染渾濁、嚴重溶血、大量血脂、異常粘稠的樣本。
6.避免接觸檢測卡上加樣孔和檢測窗處的層析膜。
7.試驗的廢棄物應視為污染物，并按當地相關規定妥善處理。
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