Regaud改良法線粒體染色試劑盒技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Regaud改良法線粒體染色試劑盒這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環，PCR就是在合適條件下的這種循環的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
Regaud改良法線粒體染色試劑盒根據客戶的實驗目的，進行PCR反應的優化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補區結合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應（70～72℃，30～60s）。
Regaud改良法線粒體染色試劑盒以上述三個步驟為一個循環，每一循環的產物均可作為下一個循環的模板，經過n次循環后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質粒、基因組DNA、PCR產物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設計
Regaud改良法線粒體染色試劑盒客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關信息（基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等），我公司提供免費的引物設計及合成。