oluene技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Toluene這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環，PCR就是在合適條件下的這種循環的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
Toluene根據客戶的實驗目的，進行PCR反應的優化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補區結合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應（70～72℃，30～60s）。
Toluene以上述三個步驟為一個循環，每一循環的產物均可作為下一個循環的模板，經過n次循環后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質粒、基因組DNA、PCR產物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設計
Toluene客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關信息（基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等），我公司提供免費的引物設計及合成。XY4001 病毒基因組DNA快速提取試劑盒 50次 XY2501 微量/臨床樣品基因組DNA快速提取試劑盒 50次 XY3001 口腔/咽拭子基因組DNA快速提取試劑盒 50次 XY2601 DNAzol 基因組DNA快速提取試劑 50ml/100ml XY3201 石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒 50次/100次 XY3601 尿液基因組DNA快速提取試劑盒 50次 XY3701 海洋動物組織基因組DNA快速提取試劑盒 50次/100次 XY4201 蛋白酶K 100mg XY3301 2 x SYBR Green qPCR Mix (Sybr green熒光染料法定量PCR) 50次×50μl/200次×50μl XY3901 2 x Real Time PCR Mix (Probe熒光探針法定量PCR) 40次×50μl/200次×50μl XY3601 TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit (兩步法熒光定量反轉錄PCR試劑盒) 25次×50μl/50次×50μl XY4601 THERMOscript SYBR Green qRT-PCR Kit(兩步法熒光定量耐熱反轉錄PCR試劑盒) 25次×50μl/50次×50μl XY4101 TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法熒光定量反轉錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl XY4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法熒光定量耐熱反轉錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl XY3501 快速植物DNA提取擴增套裝 50次/100次/200次 XY1701 TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反轉錄酶) 5000U/10000U/10000U×5 XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐熱反轉錄酶) 5000U/10000U XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (**鏈反轉錄試劑盒) 25次/50次 XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(**鏈耐熱反轉錄試劑盒) 25次/50次