ELISA試劑盒各種樣本的處理方法
血清
血清是*常用于ELISA檢查的一類樣本,處理也比較簡略。
將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。避免運用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢查時還應仔細閱覽試劑盒說明書,檢查試劑盒是不是對抗凝劑有特殊要求。
用無熱原、無內**的試管或離心管搜集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細搜集上清。
一同也應避免**污染,因為菌體內可能富含內源性的HRP然后致使檢查的假陽性。
一般我們可用于ELISA檢查的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等,不一樣類型的檢查樣本前期的處理方法是不一樣的。
ELISA試劑盒血漿
用含抗凝劑的采血管或離心管搜集血液標本,標本搜集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。
為了保證檢查的**性,保存于-20℃或-80℃的樣本*好在1~6個月內檢查;
4℃保存的樣本應在1周內進行檢查。其他,還應保證樣本不含NaN3,因為NaN3會抑制HRP的活性,然后致使假陰性的作用。
細胞培養上清
取細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。
尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢查。
ELISA試驗成功的條件是樣本的**處理加上試驗途中**的操作,**的處理樣本是保證ELISA檢查的**性和**性的**步。
總的來說,因為ELISA只能檢查可溶性蛋白的含量,所以應保證全部樣本均為弄清的液體,堆積或懸浮物都應離心去掉。
主張將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。
ELISA試劑盒采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會開釋具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為符號的ELISA檢查中會有非特異性的顯色,而致使檢查的不**性。