原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
羊睪丸間質細胞
商品屬性：
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組織來源
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睪丸組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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羊原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁培養
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細胞形態
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梭形細胞
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細胞簡介：
睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規則形，胞體較大，直徑約 20μm，胞質呈嗜酸性，細胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。睪丸支持細胞是存在于雄性睪丸間質中的主要細胞類型，其主要功能是分泌和合成睪丸酮，睪丸酮在刺激精子發生、精子成熟及性功能的維持等方面具有重要作用。目前，以睪丸支持細胞為靶向的研究備受關注。體外培養的睪丸支持細胞能直接反應對該細胞作用的特點，使分離純化睪丸支持細胞成為必要的前提條件。
細胞特性：
1）組織來源于羊的正常睪丸組織。
2)細胞鑒定：3β-HSD熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：梭形細胞，不規則細胞，貼壁培養。
推薦培養基：
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Troponin T-Slow
Skeletal
ATP依賴RNA解旋酶DDX46抗體
DDX46
核糖核蛋白抗原抗體 Anti-SSA/RO52
抑瘤素M抗體 Anti-OSM/Oncostatin M
磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 Anti-Phospho-p63
(Ser160/Ser162)
跨膜蛋白147抗體 Anti-TMEM147
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羊睪丸間質細胞CD2F-10抗體 Anti-SLAMF9
PE-Cy3標記的兔抗猴IgM
Rabbit Anti-Monkey
IgM / PE-Cy3
血小板白細胞C激酶底物源結構域M3抗體
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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