細胞簡介：

兔下丘腦神經元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調節內臟活動和活動的較神經所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區和視上區）﹑中部（結節區）和后部（體區）。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與神經系統的其它部位具有密切的相互聯系。它不僅通過神經和血管途徑調節腦垂體前﹑后葉的分泌和釋放﹐而且還參與調節自主神經系統﹐如控制水鹽代謝﹑調節體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內臟活動以及情緒等。下丘腦神經元與來自其他部位的神經纖維有廣泛的突觸聯系，可以接受很多神經沖動，為系統和神經系統的中心。它們能調節垂體前葉功能，合成神經垂體及控制自主神經和植物神經功能。故提取下丘腦神經元進行體外培養，建立下丘腦神經元體外實驗平臺具有重要意義。

方法簡介：

實驗室分離的兔下丘腦神經元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔下丘腦神經元細胞經β-Tubulin-Ⅲ熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。

培養信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：神經元細胞樣

傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%胰蛋白酶

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔下丘腦神經元細胞體外培養周期有限；建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

(1)原代細胞的培養方法

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

原代細胞的分離方法：

一、懸浮細胞的分離方法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

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