原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠脂肪細(xì)胞
商品屬性:
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組織來(lái)源
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脂肪組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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梭形、多角形
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過(guò)程;脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色(棕色)脂肪細(xì)胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達(dá)到,此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細(xì)胞,在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

公司正在出售的產(chǎn)品:
食物糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒
MCEE蛋白抗體
MCEE
白喉A抗體
Diphtheria toxin
fragment A
互養(yǎng)蛋白1,2,3抗體 Anti-Syntrophin-1+2+3
Rh血型C抗原抗體 Anti-RHCE
新的飽食分子蛋白抗體 Anti-Nesfatin-1/Nucb2
鋅指蛋白ZBTB3抗體 Anti-ZBTB3
磷酸羧化酶2抗體
PCK2
絨毛膜癌不表達(dá)蛋白1抗體
HOPX
磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 Anti-phospho-TSC1(Ser505)
豬藍(lán)耳病M蛋白抗體 Anti-PRRSV M protein
蛋白磷酸酶H1抗體 Anti-PTPH1/PTPN3
快速發(fā)育生長(zhǎng)因子源蛋白2抗體 Anti-Sprouty 2
Cy3標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG
H&L / Cy3
磷酸化細(xì)胞分化周期蛋白37抗體
phospho-CDC37
(Ser13)
受精卵抑制蛋白1抗體 Anti-ZAR1/Zygote arrest protein 1
NADPH氧化酶活化蛋白1抗體 Anti-NOXA2/p67phox
磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645)
分泌和跨膜蛋白1抗體 Anti-SECTM1
大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠脂肪細(xì)胞人對(duì)氨基苯甲酸(PABA)elisa檢測(cè)試劑盒
血液游離酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠硝基酪氨酸(NT)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠抗血小板抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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