原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠心臟微血管內皮細胞
商品屬性：
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組織來源
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心臟組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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內皮細胞樣
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細胞簡介：
大鼠心臟微血管內皮細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠心臟微血管內皮細胞經CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產品：
小鼠白介素17A(IL－17A)elisa檢測試劑盒
人缺氧誘導因子1α（HIF-1α）elisa檢測試劑盒
細胞人體鼻病毒（rhinovirus）定性檢測試劑盒
魚17-α甲睪酮(17-αMT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠神經肽W(NP-W)elisa檢測試劑盒
核蛋白相互作用蛋白1抗體 Anti-SRP1/karyopherin alpha
1
Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1 Anti-RASGRF1
磷酸化谷氨酸受體2A+2B抗體 Anti-Phospho-NMDAR2A + 2B
(Tyr1246 + Tyr1252)
鋅指蛋白Zdhhc18抗體 Anti-ZDHHC-18
細胞信號轉導分子Smad-1重組兔單克隆抗體 Smad1
線蟲GAPDH（內參）單克隆抗體 GAPDH (CAEEL,Loading Control)
α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 Alpha B Crystallin
ε-微管蛋白/ε Tubulin抗體 epsilon Tubulin
ATP依賴解旋酶RENT1抗體 RENT1+hUPF1
B細胞瘤因子9抗體 BCL9
辣椒素受體樣蛋白1抗體 TRPV2
鏈球菌溶血素O抗體 Streptolysin O
中胚層誘導早期反應蛋白3抗體 MIER3
腫瘤抑制基因LUCA15抗體 LUCA15
干擾素α2抗體 Interferon alpha 2
孤菲肽/痛敏肽抗體 Nociceptin
KNCN蛋白抗體 KNCN
MAPK/ERK激酶1抗體 MEKK1
染色質組裝因子1P60抗體 p60 CAF1
溶質載體家族22成員14抗體 SLC22A14
大鼠核連蛋白2(NUCB2)elisa檢測試劑盒
大鼠心臟微血管內皮細胞KIF20A抗體
KIF20A
染色質修飾蛋白CHMP6抗體
CHMP6
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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