(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養,是建立細胞系的步,是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
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組織來源 |
腦組織 |
規格 |
5×10?Cells/T25培養瓶 |
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細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
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生長特性 |
貼壁 |
細胞形態 |
神經元細胞樣 |
細胞簡介:
大鼠下丘腦神經元細胞分離自下丘腦;下丘腦又稱丘腦下部,位于大腦腹面、丘腦的下方,是調節內臟活動和活動的較神經所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部(又名視前區和視上區)﹑中部(結節區)和后部(體區)。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與神經系統的其它部位具有密切的相互聯系。它不僅通過神經和血管途徑調節腦垂體前﹑后葉的分泌和釋放﹐而且還參與調節自主神經系統﹐如控制水鹽代謝﹑調節體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內臟活動以及情緒等。下丘腦神經元與來自其他部位的神經纖維有廣泛的突觸聯系,可以接受很多神經沖動,為系統和神經系統的中心。它們能調節垂體前葉功能,合成神經垂體及控制自主神經和植物神經功能。故提取下丘腦神經元進行體外培養,建立下丘腦神經元體外實驗平臺具有重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞經β-Tubulin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 神經元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

公司正在出售的產品:

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大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測試劑盒
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人黑色素瘤標記物(MART/Melan-A)elisa分析檢測試劑盒
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p53靶蛋白3抗體 Anti-TP53TG3
RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體 Anti-RAB40C
2型神經纖維瘤抗體 Anti-NF2/Neurofibromin 2
神經生長因子誘導蛋白抗體 Anti-VGF/Nerve growth factor inducible
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人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)elisa分析檢測試劑盒
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細胞PDGF-B蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
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小鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測試劑盒
軸索過度生長抑制因子B受體抗體
Nogo B receptor
通用轉錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體
GTF2A1 alpha
磷酸化白細胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)
磷酸化蛋白激酶樣內質網激酶抗體 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
穿孔素抗體 Anti-Perforin
細胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 Anti-Sidekick 2
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原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養后,細胞容易貼壁生長。
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