原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
商品屬性:
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組織來(lái)源
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腎動(dòng)脈組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自腎動(dòng)脈組織;腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的網(wǎng),再匯集成出球小動(dòng)脈,出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門(mén)出腎,注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)網(wǎng):腎小球網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過(guò)形成原尿;球后網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(5-HTT/SERT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Kelch樣蛋白8抗體
KLHL8
細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體
CKAP1
人骨保素(OPG)elisa檢測(cè)試劑盒
pCAMBIA+目的基因
植物過(guò)氧化氫酶2(CAT2/CAT)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠維甲酸受體應(yīng)答蛋白2(RARRES2)elisa檢測(cè)試劑盒
NDUFB9蛋白抗體
NDUFB9
生長(zhǎng)休止特定蛋白2抗體
GAS2
動(dòng)力蛋白輕鏈 Anti-TCTEL1/DYNLT1
神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體(前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9) Anti-PCSK9/NARC1
耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體 Anti-OTOA/DFNB22
5-羥色胺/5羥色胺抗體 Anti-5-HT
蛋白激酶C mu型抗體
PKC mu
NT2NL蛋白抗體
NT2NL
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) Anti-PBEF1(CT)
磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346)
神經(jīng)元突觸膜結(jié)合蛋白2抗體 Anti-RIMBP2
TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體 Anti-TAF12
大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞猴γ干擾素(IFN-γ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IFN-γ ELISA Kit
人多效生長(zhǎng)因子(PTN)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanpleiotrophinELISAKit
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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