原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠乳腺上皮細(xì)胞
商品屬性：
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組織來(lái)源
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乳腺組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細(xì)胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡；近年來(lái)的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞（MEC）有密切聯(lián)系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開(kāi)展的關(guān)鍵步驟。乳腺是的腺體組織，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)和局部合成的生長(zhǎng)因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長(zhǎng)因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細(xì)胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠乳腺上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠乳腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素23（IL－23）elisa檢測(cè)試劑盒
DNA結(jié)合蛋白Mel18抗體
Mel18
DNAJC13蛋白抗體
DNAJC13
小鼠S100-B蛋白(S100B)elisa檢測(cè)試劑盒
N－苯甲酰－L－精氨酰胺鹽酸鹽（BAA）
體液超氧化物陰離子熒光法定量檢測(cè)試劑盒
還原型谷胱甘肽GSH測(cè)試盒 96T 微板法
過(guò)氧化物酶體**蛋白5相關(guān)蛋白抗體
PEX5L
源盒蛋白HOX13抗體
HoxC13
磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 Anti-Phospho-TIF1
beta(Ser824)
血小板源性生長(zhǎng)因子AA+BB抗體 Anti-PDGFAA + PDGFBB
前動(dòng)力蛋白2抗體 Anti-PROK2/Prokineticin 2
鈉通道蛋白10α抗體 Anti-SCN10A/NAV1.8
PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM
Rabbit Anti-Guinea
Pig IgM / PE
磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
phospho-ECT2
(Thr373)
鋅指蛋白239抗體 Anti-ZNF239
磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-phospho-NF1(Ser2515)
磷酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 Anti-phospho-RAC1(Ser71)
亞硫酸鹽氧化酶抗體 Anti-Sulfite oxidase/SUOX
大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶(HMGCS)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠乳腺上皮細(xì)胞黑色素瘤相關(guān)抗原E2/肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白3抗體
MAGEE2/HCA3
羰基還原酶2抗體
DCXR
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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