原代細胞的培養:
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養,是建立細胞系的步,是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
大鼠前列腺上皮細胞
商品屬性:
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組織來源
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前列腺
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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上皮細胞樣
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細胞簡介:
大鼠前列腺上皮細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為腺,前列腺分泌的稱為“前列腺素”。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關系密切,上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥,重度的前列腺炎患者的前列腺液內可檢測到脫落的上皮細胞,這是上皮細胞損傷的標志。炎癥發生時,與炎癥相關的一些炎癥因子可能發生變化。因此,體外培養前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等的前提和基礎。前列腺主要特征如下:①前列腺結構和功能活動均受雄性的調控;②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白(CK-5、CK-14),基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞;③前列腺上皮細胞的培養為研究前列腺的許多重要特性以及化學和性致癌作用提供了機會。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠前列腺上皮細胞采用先中性蛋白酶消化、后膠原酶-胰蛋白酶聯合消化并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠前列腺上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

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Nogo66受體相關蛋白3抗體 Anti-RTN4RL1/NgR3
神經源性神經營養因子抗體 Anti-NENF/Neudesin
鋅指蛋白274抗體 Anti-ZNF274
鉀離子通道蛋白13抗體
KCNK13
細胞周期素依賴激酶2相關蛋白2抗體
CDK2AP2
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鈉氫通道蛋白9家族A9抗體 Anti-SLC9A9
豬圓環Ⅱ型衣殼蛋白 Anti-capsid protein
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泛素蛋白連接酶C抗體 Anti-UBE2C
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原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養后,細胞容易貼壁生長。
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