原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠膀胱平滑肌細胞
商品屬性：
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組織來源
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膀胱組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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成纖維細胞樣
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細胞簡介：
大鼠膀胱平滑肌細胞分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖，膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質的分泌表型可通過細胞所經歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多中的共同路徑，因此，了解在發生及持續過程中平滑肌怎樣變化，這是方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。體外培養膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠膀胱平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠膀胱平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產品：
人α半乳糖苷酶(αGAL)elisa分析檢測試劑盒
皮質醇(Cortisol)elisa分析檢測試劑盒
載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa分析檢測試劑盒
抗壞血酸（AsA）含量測試盒
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)elisa檢測試劑盒
IKB-ALPHA蛋白共沉淀分析試劑盒
小鼠阿立新A(Orexin A)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測試劑盒
乳糖酶樣蛋白抗體 LCTL
上皮細胞膜蛋白2抗體 EMP2
LZIC蛋白抗體 LZIC
MS4A12蛋白抗體 MS4A12
腫瘤壞死因子受體相關因子5抗體 TRAF5
軸索過度生長抑制因子B受體抗體 Nogo B receptor
睪丸特異定蛋白質編碼Y1抗體 TSPY1
骨形態發生蛋白2抗體 BMP2
線粒體核糖體蛋白S25抗體 MRPS25
小腦脊髓共濟失調蛋白3抗體 ATXN3L
巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白10抗體 BBS10
白血病抑制因子受體（CD118）抗體 LIFR
CD28抗體 CD28
Cordon bleu蛋白樣1抗體 COBLL1
磷酸化2型神經纖維瘤抗體 Phospho-NF2 (Ser518)
磷酸化叉頭蛋白4抗體 phospho-FOXO4 (Ser262)
果菜（folic acid）含量微生物比色法定量檢測試劑盒
大鼠膀胱平滑肌細胞犬脂肪酸結合蛋白elisa檢測試劑盒
細胞脊髓過氧化酶（MPO）活性高質敏感比色法定量檢測試劑盒
小鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa檢測試劑盒
大鼠雌酮(E1)elisa分析檢測試劑盒
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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