原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠結腸平滑肌細胞
商品屬性：
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組織來源
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結腸組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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成纖維細胞樣
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細胞簡介：
大鼠結腸平滑肌細胞分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結腸平滑肌細胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內環形、外縱行平滑肌；結腸運動少而緩慢，對刺激的反應也較遲緩。結腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質分泌、誘發全身炎癥反應以及細胞內信號轉導途徑等研究中起著重要的作用。結腸平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。結腸平滑肌運動活性受到神經遞質、胃腸和等因素的調節。隨著現代胃腸動力學研究的進展，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發展到細胞、分子水平，要求在胃腸道單個平滑肌細胞標本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學等實驗。體外培養細胞，由于影響因素單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠結腸平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠結腸平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產品：
組織對氧磷酶1（PON1）芳酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
主導控制樣蛋白1抗體
MAML1
17號染色體開放閱讀框53抗體
C17orf53
小鼠P物質(SP)elisa檢測試劑盒
GC（氣相）試劑盒
冰凍切片組織NF KAPPA B P50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
馬白介素6(IL-6)elisa檢測試劑盒
原鈣粘附蛋白α5抗體
PCDHA5
Caspase抑制劑COP蛋白抗體
CARD16
磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC1抗體 Anti-Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)
配對盒基因9抗體 Anti-PAX9
染色質組裝因子1P55抗體 Anti-p55/DCAF1
神經突觸素13抗體 Anti-Syntaxin 13
FITC標記的兔抗人IgM
Rabbit Anti-Human
IgM / FITC
紅細胞分化相關因子1抗體
EDRF1
鋅指蛋白379抗體 Anti-ZNF379/ZDHHC9
豆蔻酰基轉移酶1抗體 Anti-NMT1
環指蛋白126抗體 Anti-RNF126
磷酸化突觸蛋白6抗體 Anti-phospho-SYT6(Thr418)
大鼠CD45分子(CD45)elisa分析檢測試劑盒
大鼠結腸平滑肌細胞LOC83459蛋白抗體
LOC83459
細胞色素B561結構域蛋白1抗體
CYB561D1
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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