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細胞簡介:
大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,分三層細胞層,外層即是上皮細胞;②角膜上皮細胞能參與先天性,能感應病原體存在并發出信號從而激活角膜防御系統;③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養對研究角膜的生理學、病理學、學以及分子生物學都是極為重要的手段,常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和對細胞生長的影響。
商品屬性:
產品名稱
大鼠角膜上皮細胞
種屬
大鼠
組織來源
眼角膜組織
規格
5×10?Cells/T25培養瓶
貨號
A01X1724
細胞形態
上皮細胞樣
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
生長特性
貼壁
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠角膜上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠角膜上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
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紅細胞膜蛋白4.2抗體
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CD84抗體
CD84
神經突起誘導因子受體UNC5B抗體 Anti-UNC5B/UNC5H2
血小板衍化生長因子β抗體 Anti-PAFAH1B2
蛋白質精氨酸亞型2抗體 Anti-PADI2/PAD2
脂肪酸轉運蛋白5抗體 Anti-SLC27A5
辣根過氧化物酶標記的羊抗大鼠IgG H&L
大鼠角膜上皮細胞轉錄因子MAFF抗體
MAFF
無精癥缺失基因1抗體
DAZ1
信息
原代細胞的培養條件:
① 靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養 a 細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性 b 細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L。 c 培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養。 d 胎牛血清濃度為10%-80%。 e 應在37℃5% CO2的培養箱中培養。。 f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮。 g 待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液 h 用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。 ② 懸浮細胞的培養要求 a 原代培養時要盡量去除紅細胞 b 短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行 c 細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗。 d 長期培養時,細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長。 f 細胞換液一般每隔3天需半量換液一次 g 細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。