原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠角膜內皮細胞
商品屬性：
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組織來源
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眼角膜組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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內皮細胞樣
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細胞簡介：
大鼠角膜內皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發揮生理功能的必要條件之一，而角膜內皮細胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內皮細胞是角膜內層的單層細胞，構成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過離子“泵”功能調節角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內皮細胞功能出現紊亂，常導致角膜水腫而使角膜部分甚至完全失去透明性。角膜內皮細胞主要功能有：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內皮細胞對角膜透明性有重要作用；③角膜內皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內Na+梯度，防止水分滲入角膜內，維持角膜實質層相對脫水狀態，維持透明性。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠角膜內皮細胞采用混合膠原酶消化結合內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠角膜內皮細胞經NSE（神經元特異性烯醇化酶）熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產品：
17-OHPELISAKit
羥基類固醇(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體
HSD17B4
ADCK1蛋白抗體
ADCK1
大鼠二酰基甘油(DAG/DG)elisa檢測試劑盒
elisa檢測試劑盒
人彈性蛋白酶(Elastase)elisa分析檢測試劑盒
沉淀法去內試劑盒
單羧酸轉運14抗體
MCT14
半乳糖基轉移酶2抗體
C1GALT1C1
轉錄因子SP6抗體 Anti-SP6
視網膜S抗原抗體 Anti-Retinal S antigen/S-antigen
神經損傷誘導蛋白2抗體 Anti-Ninjurin 2
信號通路Wnt4抗體 Anti-WNT4
跨膜TMIGD1蛋白抗體
TMIGD1
周期素M3抗體
Cyclin M3
細胞衰老相關蛋白1抗體 Anti-SEN1/Mortality factor 4-like protein 1
樣物質結合蛋白/細胞粘附分子樣蛋白抗體 Anti-OPCML
果膠酶抑制蛋白18抗體 Anti-Pectinesterase inhibitor 18
脂多糖相關反應蛋白5/γ-taxilin抗體 Anti-Gamma-taxilin/LSR5
AF647標記的人IgG
大鼠角膜內皮細胞倉鼠γ干擾素(IFNG)elisa分析檢測試劑盒
IFNG ELISA kit
人第八因子相關抗原(FⅧAg)elisa分析檢測試劑盒
FⅧAgELISAKit
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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