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組織來源 |
視網膜組織 |
規格 |
5×10?Cells/T25培養瓶 |
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細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
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生長特性 |
貼壁 |
細胞形態 |
上皮細胞樣 |
細胞簡介:
大鼠視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感??器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力強。視網膜色素上皮(RPE)位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道;主要是由單層色素上皮細胞所構成,排列十分規則。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形,細胞分為三部分,即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力,細胞死亡后不被替換,而是鄰近的細胞向側面滑動,以填補死亡細胞**下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間,是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環,吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性,并分泌多種生長因子,幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠視網膜色素上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠視網膜色素上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養,是建立細胞系的步,是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產品:
體外非細胞系統細胞色素P450亞酶2C18(DICLOFENAC)活性高效液相色譜法(HPLC)定量檢測試劑盒
組織環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量檢測試劑盒
人γ-谷氨酰環化轉移酶(GGCT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白細胞介素1β(IL-1B)elisa檢測試劑盒
小鼠細胞骨架活性調節蛋白(ARC)elisa檢測試劑盒
載玻片細胞P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
elisa檢測試劑盒
石蠟切片組織線粒體DNA分離試劑盒
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)elisa檢測試劑盒
染色盒源物4重組兔單克隆抗體 CBX4
人絨毛膜促性腺β亞基/β-HCG單克隆抗體 HCG Beta(4H7)
IGFBP2結合蛋白/遷移和侵潤抑制蛋白抗體 MIIP
Kelch樣蛋白8抗體 KLHL8
粘脂蛋白2抗體 mucolipin 2
脂閥結構蛋白1抗體 Flotillin 1
蝮蛇蛇毒蛋白(毒液蛋白)抗體 Viper Venom protein
甘油二酯激酶γ/DGK-γ抗體 DGKG
細胞色素c氧化酶5A抗體 COX5A
細胞粘附分子CD112抗體 CD112
XRN1蛋白抗體 XRN1
βA3/A1-crystallin蛋白抗體 beta Crystallin A3
APC標記人CD81單克隆抗體 human CD81/APC
A型流感病毒核輸出蛋白抗體 Influenza A Nuclear export protein
苦參堿型鋅指蛋白5抗體 ZMAT5
連接粘附分子C抗體 JAMC
小鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)elisa檢測試劑盒
大鼠視網膜色素上皮細胞大鼠T細胞活化核因子5(NFAT5)elisa分析檢測試劑盒
NFAT5 ELISA Kit
人廣州管園線蟲抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
Humananti-angiostrongyluscantonensisantibodyIgMELISAKit
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