原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠滑膜成纖維細胞
商品屬性：
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組織來源
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滑膜
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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???相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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成纖維細胞樣
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細胞簡介：
大鼠滑膜成纖維細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能：①滑膜細胞產生潤滑液成分，并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠滑膜成纖維細胞采用混合酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠滑膜成纖維細胞經Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠滑膜成纖維細胞體外培養周期有限；建議使用配套的生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
公司正在出售的產品：
土壤過氧化氫酶（S-CAT）測試盒
脂肪水解酶LIPN抗體
LIPN/Lipase N
CTAGE6蛋白抗體
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冰凍切片組織IL蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
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核受體蛋白NR2E1抗體
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糖原蛋白1抗體
GYG1
腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體 Anti-TRAF3/CD40bp
甲狀旁腺相關蛋白抗體 Anti-PTHrP/PTHLH
磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 Anti-phospho-PIK3R2(Tyr467)
SARM1蛋白抗體 Anti-SARM1
磷酸化珠蛋白轉錄因子1抗體
phospho-GATA1
(Ser161)
嗅覺受體5F1抗體
OR5F1
乙型肝炎X蛋白反轉錄蛋白4抗體 Anti-XTP4
胞內活化的Notch1蛋白抗體 Anti-NOTCH1/activated Notch1
受體表達蛋白5/息肉相關蛋白抗體 Anti-REEP5
鈉離子通道蛋白7α/Na+
CP type VIIα抗體 Anti-SCN7A
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大鼠滑膜成纖維細胞LSM5蛋白抗體
LSM5
轉錄因子BTF3抗體
BTF3
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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