(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養,是建立細胞系的步,是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內生長特性,適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
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組織來源 |
海綿體組織 |
規格 |
5×10?Cells/T25培養瓶 |
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細胞分類 |
大鼠原代細胞 |
培養條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
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生長特性 |
貼壁 |
細胞形態 |
成纖維細胞樣 |
細胞簡介:
大鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中,在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系,破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠海綿體平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

公司正在出售的產品:

小鼠球蛋白M(IgM)elisa檢測試劑盒
小鼠α1干擾素(IFN-α1)elisa分析檢測試劑盒
蛋白電泳2倍樣品處理液
?體外肌動蛋白(ACTIN)結合分子(binding molecules)檢測試劑盒
雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)elisa分析檢測試劑盒
大鼠葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)elisa檢測試劑盒
CD56-PE
土壤淀粉酶測試盒
通用型苜蓿花葉病病毒(Alfalfa Mosaic Virus;AMV)
GSK3β相互作用蛋白抗體 HSPC210/GSK3beta interaction protein
G蛋白偶聯受體37/帕金森相關內皮素受體樣受體抗體 GPR37
腦腸肽受體抗體 Ghrelin Receptor
釀酒酵母核孔蛋白NSP1抗體 Nsp1p
二酰基甘油酰基轉移酶2樣蛋白6抗體 DGAT2L6
防御素β-121/β-defensin 121抗體 DEFB121
陽離子通道精子相關蛋白1抗體 CATSPER
胰腺特異轉錄因子PTF1A抗體 PTF1A
SGEF蛋白抗體 SGEF
S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體 AMD1/SAMDC
源盒蛋白Meis2抗體 MEIS2
脫氧輔合酶蛋白抗體 DHPS
膠質細胞谷氨酸運載蛋白4抗體 EAAT4
精神分裂癥與犰狳重復基因抗體 ARVCF
6號染色體開放閱讀框206抗體 C6orf206
AF488標記人CD25單克隆抗體 human CD25/AF488
大鼠心營養素樣細胞因子1(CLCF1)elisa檢測試劑盒
大鼠海綿體平滑肌細胞大鼠高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa分析檢測試劑盒
HDL-C ELISA kit
豚鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)elisa分析檢測試劑盒
MIFELISAKit
原代細胞的分離方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養后,細胞容易貼壁生長。
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