原代細胞的培養：
(1)原代細胞的培養方法
原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的培養，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
大鼠骨骼肌細胞
商品屬性：
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組織來源
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骨骼肌組織
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規格
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5×10?Cells/T25培養瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態
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成纖維細胞樣
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細胞簡介：
大鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌細胞經α-Sarcometric actin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產品：
人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa檢測試劑盒
大鼠中性粒細胞趨化因子-1（CINC-1）elisa檢測試劑盒
細胞CDK4蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa檢測試劑盒
阿爾新藍（ALCIAN BLUE）染色試劑盒
大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)elisa檢測試劑盒免費代測
CASPASE-5蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
小鼠Toll樣受體2(TLR2)elisa檢測試劑盒
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒
熱休克蛋白70家族蛋白6抗體 HSPA6
溶血磷脂酸受體蛋白2抗體 LPA2
IZUMO1蛋白抗體 IZUMO1
KIAA1737蛋白抗體 KIAA1737
真核翻譯起始因子4B抗體 EIF4B
植物肌動蛋白（內參）單克隆抗體 Plant actin(Loading
Control)
鈣調蛋白激酶激酶α抗體CaMKKα CaMKK1
肝血管**素相關蛋白4抗體 Angiopoietin-like 4
細胞色素P450 4Z2P抗體 CYP4Z2P
細胞周期調控因子P78抗體 MCRS1/p78
zeta相關蛋白70單克隆抗體 ZAP70
β-乳球蛋白抗體 Beta-lactoglobulin
ASTE1蛋白抗體 ASTE1
Beta氨基己糖苷酶beta亞基蛋白A鏈抗體 HEXB chain A
跨膜蛋白SEMA4B抗體 SEMA4B
聯會復合體蛋白3抗體 CTDSPL
面食甘露糖比色法定量檢測試劑盒
大鼠骨骼肌細胞犬Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒
10％Formalin固著液
小鼠巨噬細胞移動因子（MIF）elisa檢測試劑盒
大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。
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