ELISA試劑盒中酶標記抗體實現信號放大的的過程
ELISA試劑盒中的酶標記抗體是實現高靈敏度檢測的關鍵。這種抗體的特殊之處在于它結合了高度特異性的抗體部分和具有催化活性的酶部分。這一過程主要通過酶的催化活性來完成,具體步驟如下:
1、特異性結合:酶標記抗體中的抗體部分會特異性地識別并結合到已固定在微孔板上的抗原或樣品中的目標抗原上。這種結合是基于抗原抗體的特異性反應。
2、信號轉換:一旦酶標記抗體與抗原結合,它所攜帶的酶就會與酶底物接觸。
3、催化反應:酶催化酶底物發生化學反應,這個過程會產生一種顏色變化的產物。例如,常用的底物TMB(3,3',5,5'-四甲基聯苯胺)在HRP(辣根過氧化物酶)的催化下會**藍色產物,加入終止液后變為黃色。
4、信號放大:一個酶分子可以連續催化多個底物分子,因此一個結合事件可以通過酶的催化作用,產生大量的顯色產物。這個過程極大地放大了初始結合事件的信號,使得即使是非常微量的目標抗原也能被檢測到。
5、顯色反應:底物溶液通常是無色的,但當它遇到酶時,會在酶的催化下發生化學變化,產生有顏色的產物。這個顯色反應是可逆的,直到加入終止液才會停止。
這種信號放大的機制使得ELISA試劑盒能夠檢測到非常低濃度的目標分子,從而提高了檢測的靈敏度和準確性。