聚合酶鏈反應技術(Polymerase chain raction ,PCR)是一種在體外擴增特定DNA片段的方法,可用很短時間使目的基因或某一片段擴增十萬乃至幾百萬倍。
1、模板DNA
來源比較廣,幾乎所有形式的DNA和RNA都能作為PCR反應的模板。
2、緩沖液
用于維持DNA聚合酶的活性和穩定性。
3、dNTP
四種dNTP是PCR原料,其比例和濃度與PCR密切相關。
4、TaqDNA聚合酶簡稱Taq酶
在1969年在美國黃石國家公園溫泉中發現。Taq酶具有良好的熱穩定性,在92.5℃、95℃和97.5℃的半衰期為120 min、40 min、5min;
5、其它成分
Mg2 能活化DNA聚合酶;二甲基亞砜有利于DNA的變性;TMAC可去除非特異擴增,促進PCR;甘油有利于DNA復性,不過并不是對所有的PCR都有利。