關(guān)于潔凈室檢測問題的認識：

隨著我國醫(yī)藥行業(yè)GMP 制度的逐步實施，微電子、生物制藥技術(shù)突飛猛進，空氣潔凈技術(shù)被廣泛地應用于生物制品、生化制藥、醫(yī)院制劑、食品飲料、基因工程等醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，對無塵車間的要求越來越高。目前我國有超過6000家制藥廠須按GMP標準提高潔凈車間的等級。因此，普及潔凈室的知識，加強潔凈度的檢測工作，提高對潔凈窒維護管理的認識，在當前實際工作中就顯得尤為重要。筆者結(jié)合在檢測工作中的心得，談談有關(guān)潔凈室潔凈度檢測問題的一些看法。

1.潔凈室的微生物污染

1.1 來自人體、空氣的污染在正常生理作用或某些病理狀態(tài)下，人體表皮細胞鱗屑總是不斷地脫落下來，每分鐘大約7000～10000個左右，其中10%帶有**。由于空氣中懸浮著大量的塵粒，為**提供了載體和生存條件，所以大氣是*主要的**來源。

1.2空調(diào)系統(tǒng)如果處理的不好，也是主要的**來源。按照微生物學理論，塵粒和水分可以為**提供必要的生存條件。因此，凡是有塵粒和水分的地方就會有**繁殖。空調(diào)系統(tǒng)有不少的地方既容易積聚塵粒又容易形成水分或高濕度區(qū)域。這些地方為霉菌的生長和繁殖創(chuàng)造了條件。借助空氣的流動將塵粒和**帶到被污染的區(qū)域，而正是因為空氣的流動性大，污染的范圍大，污染過程比較復雜，控制起來難度就比較大。是一個是值得注意的重點。

2.微生物檢測現(xiàn)通常應用浮游菌采樣器和沉降菌數(shù)(菌落)/m3來表示。

2.1 浮游菌采樣器在檢測過程中主要控制采樣量，因此采樣器必須定時進行檢定。校驗項目包括定時器、轉(zhuǎn)盤、流量計等，以保證*終測試數(shù)據(jù)的可靠性。在檢測過程中，采樣器的**也至為重要，要先用**劑對采樣器的表面包括頂蓋、采樣管、轉(zhuǎn)盤進行嚴格的**；此外采樣者的雙手及與被檢測區(qū)域潔凈度相應的工作服穿戴應作到非常規(guī)范化，才能保證數(shù)據(jù)的可靠性。使用方法：采用計數(shù)濃度法，通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)皿，在22～25℃ 的適宜條件下讓其繁殖至可見的菌落進行計數(shù)，以此來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物并評定潔凈室的潔凈度。表1示國內(nèi)外浮游菌測定標準。

 2.2一般工作中，采用沉降菌檢測來監(jiān)控潔凈室比較普遍。在測量沉降菌之前，被檢測潔凈室的溫、濕度已經(jīng)達到規(guī)定要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速要控制在規(guī)定值內(nèi)，潔凈室已經(jīng)過**。在靜態(tài)狀況下進行測試，工作區(qū)測點位置離地0.8～1.0m，沉降菌的*少采樣點數(shù)可按表2確定：表2 *少采樣點數(shù)目注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指送風面積：對非單向流潔凈室指房間面積。在設(shè)定*少采樣點數(shù)的同時，還要決定*少培養(yǎng)皿數(shù)，用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)，再計算平均菌落數(shù)，來評定潔凈室是否合格。取10000級潔凈室沉降菌實際測定結(jié)果為例：

 表3 10000級潔凈室沉降菌的測定根據(jù)我國GMP的標準，菌落數(shù)在10萬級應≤10/m3；萬級應≤ 3/m3；百級≤ 1/m3。此結(jié)果符合國內(nèi)有關(guān)沉降菌測定的標準。

2.3測量菌落是一項很耗時的工作，并且不能實時進行。只有把沉降板放在被檢測區(qū)域才行。檢測結(jié)果受到多種條件的控制

①氣流：**以塵粒為載體會按空氣的方向和速度運動，因此控制氣流的形式具有重要的意義。永遠適用的原則是：氣流要從*潔凈的房間流向次潔凈的房間；

②沉降板的擺放及時間：需要根據(jù)各種因素制定相應的規(guī)范，以確保能真實地反映潔凈室的潔凈度；

③ 隨著新的國際標準IS0的逐步實施，潔凈室微生物檢測標準也會更加嚴格。

由于空氣中的塵粒(微粒)可以瞬間就測量出來，人們試圖找到空氣中的微粒與**數(shù)目之間的數(shù)量關(guān)系。但是，在微粒與細菌菌落的數(shù)目之間沒有一對一的關(guān)系。現(xiàn)已證明。直徑≥3～5μm的微粒對病毒和**的傳輸有責任。不過在潔凈室中可能有很多的微粒是由于潔凈服或無菌的敷料而產(chǎn)生的。這些微粒自然與**的污染沒有關(guān)系。

3.懸浮粒子的檢測

3.1目前，檢測塵粒使用各種型號的塵粒計數(shù)器，其性能指標基本上能符合檢測要求，但普遍存在一定的問題：

①**度不夠。所測量的懸浮粒子數(shù)以粒研計，而實際檢測標準卻是粒/m3，需將檢測結(jié)果進行換算，造成一定的誤差，體現(xiàn)不出真實的數(shù)據(jù)；

②儀器光電管容易老化，噪聲大；

③儀器的檢定工作太局限(國內(nèi)只有幾個計量部門檢定)，給使用單位的檢測工作帶來不便。

3.2在對潔凈室進行檢測前，除按規(guī)定標準進行**外，還要開啟凈化設(shè)備約30min左右，待潔凈室內(nèi)空氣氣流穩(wěn)定后方可進行檢測。在檢測的過程中，發(fā)現(xiàn)不同程度的存在一些問題：

①沒有必要長時間開啟凈化器。若潔凈室需要很長的時間才能自凈，就說明設(shè)計存在問題。一般說來，10萬級房間提前開啟凈化器的時間不超過40min，萬級房間不超過30min，塵粒數(shù)就應該達到當前GMP規(guī)定的潔凈度標準；

②被檢測區(qū)域濕度超標，原因可能是工作人員認為地面濕度大(濕度大于65%RH時)會減少塵粒數(shù)，但實際上這樣會導致霉菌的生長；

③ 如果在設(shè)計級別潔凈室時，設(shè)計標準比規(guī)定要求高一個級別，如要求100萬級，按30萬級設(shè)計；要求30萬級，按10萬級設(shè)計。筆者認為這樣能夠保證所設(shè)計的潔凈室在一定的時間內(nèi)，很快達到規(guī)定要求的級別標準。

4.認識潔凈室維護管理的重要性

對潔凈室進行正確的、常規(guī)的運行維護與管理，是保證潔凈室能正常運轉(zhuǎn)的重要工作。在檢測過程中，曾發(fā)現(xiàn)有的工作人員在潔凈室的維護和管理的認識上存有問題。要認識到：保證潔凈室的正常運轉(zhuǎn)。其運行管理是與設(shè)計及施工并重的，設(shè)計、施工和維護在潔凈室的質(zhì)量保證中是三足鼎立的。尤其要注意到：

① 指定專人負責潔凈室主要參數(shù)的日常監(jiān)督檢測，并建立相應的檢測記錄制度；

② 定期對潔凈室的工作人員進行培訓，掌握GMP中有關(guān)潔凈室、凈化系統(tǒng)的養(yǎng)護、使用和維護的知識；

③ 注意化學**劑的定期更換；潔凈室內(nèi)不同潔凈度區(qū)域要有各自專用的**用品，防止交叉。

5.討論與建議

在確定潔凈室的級別時，根據(jù)確定閾值或測定方法的不同，會遇到各種規(guī)定中相互矛盾的要求，這可能是對潔凈室的要求和對工藝有關(guān)的要求之間的差異。而GMP標準則完全側(cè)重于制藥行業(yè)中特定的要求，同時還規(guī)定了對潔凈室的要求。目前由于GMP標準并沒有提供完整的細則，所以顯得有些太籠統(tǒng)而不能反映技術(shù)要求的全貌。就目前的實際情況看GMP標準中關(guān)于潔凈室的規(guī)定還遠遠不夠，因此有必要要求藥品生產(chǎn)企業(yè)、醫(yī)院制劑單位對潔凈室(區(qū))，在現(xiàn)有的狀態(tài)下做好自控工作，從基本環(huán)節(jié)的驗證做起。充分認識到潔凈度與藥品質(zhì)量的重要關(guān)系。對有潔凈度要求的環(huán)境，嚴格執(zhí)行現(xiàn)有的該行業(yè)的潔凈標準要求，按規(guī)定進行自檢，加強有關(guān)人員的專業(yè)知識培訓，強化對潔凈知識的認識，保證人民用藥的**有效