波長的正確選擇有利于提高測定的靈敏度和減少測定誤差。光度學方法有單波長和雙波長之分,有的 生化分析儀 可用三波長、甚至多波長,以及兩波長比率等。有的生化分析儀可作導數(shù)光譜分析。單波長測定易受樣品溶血、黃疸、脂濁等因素干擾。雙波長測定可以通過副波長加以修正,減少甚至消除干擾因素,提高測定準確性。采用同光束雙波長,亦有利于排除光源強度變化對結果的影響。
1、測定波長選擇有三個主要條件:
1、測定波長選擇有三個主要條件:
(1)待測物質在該波長下的光吸收*大。
(2)其吸收峰宜較寬而鈍,而不是處于尖峰或陡肩,一般不選光譜中的末端吸收峰,換句話說,該吸收峰處的吸光度隨波長變化較小。
(3)常見干擾物在該波長下的光吸收*小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。實際波長選擇需要了解待測物質和干擾組分對不同波長單色光的吸收程度,即以波長為橫坐標、吸光度為縱坐標作吸收光譜曲線(光吸收曲線)。
采用透射**比濁法,**復合物大小約35~100mn之間,于波長290~410nm下有*大吸收峰,常取340nm;如用膠乳增強**濁度法,理想的檢測波長可增至可見光區(qū)。
采用透射**比濁法,**復合物大小約35~100mn之間,于波長290~410nm下有*大吸收峰,常取340nm;如用膠乳增強**濁度法,理想的檢測波長可增至可見光區(qū)。
2.雙波長測定當待測物質與干擾組分的吸收光譜互相重疊、出現(xiàn)非特異光吸收,或因反應液混濁出現(xiàn)光散射時,可以采用雙波長(或多波長)測定。雙波長測定的原則是根據(jù)干擾組分和待測物質吸收光譜的峰形特征,選擇兩個波長和,使干擾組分在這兩個波長處的吸光系數(shù)相等,而使待測物質在兩波長處的吸光系數(shù)有顯著差別。
資料來源于 半自動生化分析儀 生產廠家普朗醫(yī)療網編發(fā)表--http://www.518center.com/
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